轉染是細胞在一定條件下主動或被動導入外源DNA片段而獲得新的表型的過程,從本質上講和轉化沒有根本的區別。
轉染是什么意思
轉染可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染。
瞬時轉染是指外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析。一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時內分析結果,常常用到一些報告系統如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫助檢測。
穩定轉染是指外源DNA既可以整合到宿主染色體中,也可能作為一種游離體存在,盡管線性DNA比超螺旋DNA轉入量低但整合率高,外源DNA整合到染色體中概率很小,通常需要通過一些選擇性標記反復篩選得到穩定轉染的同源細胞系。
無論是轉染還是轉化,其關鍵因素都是用氯化鈣處理大腸桿菌細胞,以提高細胞膜的通透性,從而使外源DNA分子能夠容易進入細胞內部。
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